国产精品视频观看,又大又粗有色,琪琪吊操人妻日韩精品,欧美 国产 日韩成人

服務(wù)熱線

15021010459
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > CD34+造血干細胞轉(zhuǎn)染神器:ProteanFect Max

CD34+造血干細胞轉(zhuǎn)染神器:ProteanFect Max

更新時間:2025-01-15 點擊次數(shù):584
CD34+造血干細胞是血液系統(tǒng)中的關(guān)鍵細胞,具有自我更新和多向分化潛能。通過轉(zhuǎn)染技術(shù),可以研究基因功能并開發(fā)新的治療策略。ProteanFect Max作為一種高效的轉(zhuǎn)染試劑,已被證明能顯著提高mRNA轉(zhuǎn)染效率,且對細胞分化影響較小。

2. 材料與方法

2.1 CD34+造血干細胞的分選

使用動員人單采血或臍帶血,通過陽性選擇分選試劑盒分離CD34+細胞。推薦使用Lymphoprep™(Stemcell, 07861)作為分離試劑,以及CD34 MicroBead Kit, human(Miltenyi Biotec, 130-046-702)進行細胞分選。

2.2 培養(yǎng)基的配制

  • SFEM II培養(yǎng)基(Stemcell, 09655)和StemSpan™ CC100(Stemcell, 02690)以99:1比例混合。
  • 若添加抗生素,需稀釋1000倍。
  • 配制完成后,培養(yǎng)基應(yīng)放置于4°C冰箱儲存,并盡量在1個月內(nèi)使用完。

2.3 細胞培養(yǎng)與傳代

  • 分選后的CD34+細胞以300g離心5分鐘,用1 mL完·全培養(yǎng)基重懸后計數(shù)。
  • 根據(jù)計數(shù)結(jié)果,將細胞重懸至105 cells/mL的密度,接種到T25培養(yǎng)瓶或細胞培養(yǎng)板中。
  • 3天后補液一次,若進行轉(zhuǎn)染實驗,需調(diào)整細胞密度至2×105 cells/mL,并隔天補液。

2.4 轉(zhuǎn)染操作

  • 轉(zhuǎn)染核酸:mRNA。
  • 轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基:使用Opti-MEM培養(yǎng)基或無血清RPMI 1640/無血清DMEM培養(yǎng)基。
  • 轉(zhuǎn)染體系:配置ProteanFect Max轉(zhuǎn)染體系,具體protocol需參考私戳獲取。
  • 細胞準備:確保細胞活率超過90%,避免反復(fù)離心。
  • 轉(zhuǎn)染過程:孵育時間建議15分鐘,適當(dāng)延長可提高轉(zhuǎn)染率,但可能影響細胞活力。
  • 效率檢測:使用陽性對照mRNA,轉(zhuǎn)染后5-48小時內(nèi)觀察EGFP表達。細胞活率可通過鏡下觀察、臺盼藍、AO/PI染色或流式細胞術(shù)檢測。

3. 結(jié)果

使用ProteanFect Max轉(zhuǎn)染的CD34+造血干細胞顯示出高達72.3%的mCherry+表達率,而未處理組僅為0.25%。此外,轉(zhuǎn)染后細胞的分化狀態(tài)未受顯著影響,CD71+CD235-細胞比例在轉(zhuǎn)染后第2天和第3天保持穩(wěn)定。

華雅思創(chuàng)生物®專注于提供CGT、分子診斷和先進醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品,我們的客戶遍及細胞治療、疫苗抗體、醫(yī)療診斷、腦科學(xué)、合成生物、長壽研究和醫(yī)美保健等領(lǐng)域。"買試劑,找華雅",華雅思創(chuàng)生物®憑借深厚的技術(shù)實力和嚴格的質(zhì)量控制體系,已成為眾多科研機構(gòu)和生物制藥企業(yè)的首·選供應(yīng)商。


2025 版權(quán)所有 © 重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司主要經(jīng)營干細胞研究 干細胞治療產(chǎn)品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發(fā)等產(chǎn)品。

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

400-021-2200

掃一掃,關(guān)注我們

日本ww欧美中文字幕在线播放| 真人毛片一24| 一级肏片| 无码人妻丰满熟妇区毛片中文字幕| 一及黄片免费看| 青草影院内射中出高潮| 欧美又粗又长又爽做受| 国产二区久久精品视频| 亚洲免费福利视频一区二区三区 | 婷婷基地在线观看| 亚洲综合区小说| 精品在线免费视频| 无码中文字幕av免费放dvd| 黑人巨大亚洲一区二区久| 亚洲欧美日韩精品香蕉| 插插插免费观看| 中国凸偷窥XXXX自由视频妇科| 国产一级a爱片天天视频| 摸进她的内裤里疯狂揉她.视频 | 国产精品无码日日蜜臂AV| 亚洲综合欧洲综合| 高清无码一区二区中文字幕| 欧美一区在线视频| 国产午夜精品美女视频福利| 一级无码在线观看| 亚洲国产成人丁香五月激情在线视频免费| 五月丁香手机综合| 狠狠躁日日躁夜夜躁欧美老妇| 欧美激情精品久久| 欧美熟妇交换乱战多P| 九九久久99综合一区二区| 韩日欧美不卡| 国产精品勾引自拍| www香蕉com在线看| 色欲大学生在线| 日韩欧美一区二区区别| 超碰福利爱爱| 精品国产欧美激情| 在线视频h| 四虎.| 国产白袜美女在线|