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盤點RNA降解的常見原因

更新時間:2023-11-02 點擊次數(shù):3330

RNA降解是一個常見的問題,特別是在進行RNA提取和下游分析時。以下是導致RNA降解的一些常見原因及其相應的解決方案:

  1. 新鮮細胞: 裂解液不足會導致裂解不充分,從而使部分RNA未被釋放出來。為了確保RNA釋放出來,應在裂解過程中加入足夠的裂解液。

  2. 新鮮組織: 若組織中含有內(nèi)源性核酸酶,則很難避免RNA酶的降解。建議采用的方法是在液氮條件下將組織研磨,并且,在勻漿時采用更多的裂解液。

  3. 冷凍樣品: 如果樣品未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放,會使RNA緩慢降解。為了避免這種情況,應在樣品取材后迅速置于液氮中冷凍存放,然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放。

  4. 外源RNA酶的污染: 實驗試劑、器械等實驗用品應采用DEPC水滅菌處理,以消除外源RNA酶的污染。

  5. 內(nèi)源RNA酶的污染: 抑制劑失效或者用量不夠,以及實驗樣品過多或勻漿溫度過高都可能導致內(nèi)源RNA酶的污染。為了減少內(nèi)源RNA酶的影響,可適當增加抑制劑的濃度,確保樣品處理時處于適宜的溫度。

  6. 長時間暴露于高溫或光照環(huán)境下: RNA容易受到紫外線和高溫的影響而發(fā)生降解,因此在實驗過程中應避免樣品暴露于高溫或光照環(huán)境下。

  7. 提取過程中的反復冷凍解凍: 這種情況會破壞RNA結(jié)構(gòu),使其更容易受到酶的作用而降解。因此,在RNA提取過程中應盡量減少冷凍解凍次數(shù),最好一次性完成整個提取過程。


產(chǎn)品名稱:PAXgene全血RNA管 樣本采集保存
產(chǎn)品貨號:762165

產(chǎn)品規(guī)格:2.5mL,100支/盒

PAXgene血液RNA管旨在立即穩(wěn)定細胞內(nèi)RNA,從而產(chǎn)生準確且可重復的基因表達數(shù)據(jù)。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑,可在采集后立即穩(wěn)定細胞內(nèi)RNA。細胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長達三天或在2-8°C下穩(wěn)定長達五天。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍,以便長期儲存。

產(chǎn)品信息

管材 塑料

管尺寸16x100 mm

采血量2.5 mL

管蓋 BD Hemogard型閉合器

封口顏色 紅色

添加劑6.9 mL專有RNA穩(wěn)定添加劑

滅菌輻射 10-6 SAL,ISO11137-1


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