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怎樣避免細胞污染

更新時間:2022-06-27 點擊次數(shù):1218
   細胞是構(gòu)成人體結(jié)構(gòu)和功能的最基本單位,人體就是由大量的不同類型的細胞組成的,在不同的組織器官,含有不同的細胞,分別具有不同的結(jié)構(gòu),執(zhí)行不同的功能。比如血液中有三種血細胞,分別是紅細胞白細胞和血小板,紅細胞具有運輸氧氣和二氧化碳的功能,白細胞在人體的免疫功能中發(fā)揮著重要作用,血小板是人體負責止血的血細胞。另外,人體還有多種其他類型的細胞,分別執(zhí)行著不同的功能。
  怎樣避免細胞污染:
  1.實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉(zhuǎn)5-10min再開始實驗操作。
  2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于空氣的流通;實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
  3.每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。
  4.操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。
  5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,最后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。
  6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
  注意事項:
  1、 DMSO配制的時候會放熱,一定要等凍存液冷卻后使用,避免灼傷細胞;
  2、 細胞離心后盡量吸干凈上清液,減少培養(yǎng)基殘留,避免稀釋凍存液;
  3、 不建議手動梯度降溫,溫度不穩(wěn)定,容易降低存活率;
  4、 注意程序降溫盒內(nèi)異丙醇的量必須高于低刻度線;凍存5次后異丙醇需要更換一次,以免影響凍存效果;程序降溫盒需恢復(fù)到室溫以后才能繼續(xù)使用,不能從冰箱拿出來直接使用;
  5、 細胞懸液加入凍存液以后盡量短時間的在常溫放置,DMSO常溫下對細胞損傷大,分裝完成后立即轉(zhuǎn)入程序降溫盒放到-80度冰箱,不需要放4度;
  6、 -80度凍存過夜后可以轉(zhuǎn)入液氮長期保存,轉(zhuǎn)入液氮的過程需要對凍存盒進行保冷,不要長時間在常溫暴露,避免凍存管融化;
  7、 若沒有液氮罐,存放在-80度的時候一定要放靠里面的位置,避免開關(guān)冰箱導致溫度不穩(wěn)定。
  8、 細胞凍存后應(yīng)取出一管復(fù)蘇,檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內(nèi)長期保存,為穩(wěn)妥起見可在細

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